克隆篩選（單細胞分離）細胞打印系統

 作為制備靶向治(zhi)療藥(yao)物的(de)一種方法，克隆細胞系的(de)發展已經(jing)越(yue)來越(yue)受到重視和投入，然而(er)面對單細胞(bao)克隆日益增(zeng)長(chang)的(de)(de)(de)實(shi)驗需(xu)求， 目前常用的(de)(de)(de)實(shi)現(xian)方法都不盡(jin)如人意。 通過(guo)有限稀(xi)釋和顯微鏡操作，或利用像流(liu)式細胞(bao)儀這類的(de)(de)(de)自(zi)動化設備進行細胞(bao)的(de)(de)(de)篩選和分離，數量(liang)少(shao)且(qie)非常耗(hao)費時間和精力，缺少(shao)克隆性的(de)(de)(de)依據，細胞(bao)存活(huo)率低，不能有效(xiao)處(chu)理小批量(liang)樣本(ben)，且(qie)具有較(jiao)(jiao)高的(de)(de)(de)交叉污染風險(xian)。這些設備的(de)(de)(de)采購和運營成本(ben)較(jiao)(jiao)高，但卻(que)缺乏證實(shi)克隆來自(zi)單細胞(bao)的(de)(de)(de)證明(ming)。

    德國cytena公司開發的單細胞打印機（CloneSelect SCP）則有效解決了這一問題。這款zhuan利產品(pin)技(ji)術(shu)將細(xi)(xi)胞(bao)檢測傳感器和按需(xu)(xu)滴定印(yin)刷(shua)技(ji)術(shu)相結合。過(guo)(guo)程(cheng)類似(si)于(yu)傳統的(de)(de)噴墨打(da)印(yin)機。通(tong)過(guo)(guo)在細(xi)(xi)胞(bao)輕(qing)輕(qing)的(de)(de)沉積(ji)在孔(kong)板之前篩選出單個(ge)細(xi)(xi)胞(bao)和細(xi)(xi)胞(bao)形態，確保(bao)細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)活力；使用無菌的(de)(de)，一(yi)次性的(de)(de)打(da)印(yin)墨盒避免了交叉(cha)污染；在沉積(ji)的(de)(de)過(guo)(guo)程(cheng)中，提供單細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)圖像，為用戶提供了他們的(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)系是來自(zi)于(yu)單克隆的(de)(de)證(zheng)據，符合FDA對單抗的(de)(de)生(sheng)產需(xu)(xu)證(zheng)實來自(zi)于(yu)單個(ge)細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)要求，大大提升藥品(pin)的(de)(de)開發進程(cheng)。

克隆篩選（單細胞分離）細胞打印系統

      Cytena開(kai)發的(de)(de)(de)單(dan)細(xi)(xi)胞打印機是臺式的(de)(de)(de)自動(dong)化(hua)的(de)(de)(de)實驗(yan)室(shi)設備，由于軟件采用(yong)直(zhi)觀，友好的(de)(de)(de)界面設計(ji)，所以無需特別的(de)(de)(de)經驗(yan)，實驗(yan)室(shi)的(de)(de)(de)任何成員都可(ke)以進行操作 ，設備的(de)(de)(de)操作設置簡單(dan)快速，分離一塊含單(dan)細(xi)(xi)胞的(de)(de)(de)96孔板只需幾分鐘(zhong)時間。

工作原(yuan)理(li)：

    SCP技術基于(yu)頂端的透明微(wei)型分(fen)配芯片，用于(yu)從細(xi)胞(bao)懸浮中按需生成微(wei)滴。分(fen)配器芯片是(shi)一個包含微(wei)流體(ti)(ti)結構的硅玻璃化(hua)合物，被稱為(wei)劑量室的背面有一個硅膜（圖b），它被一個壓電板制(zhi)動(dong)器所擠壓偏(pian)轉，這種擠壓偏(pian)轉導致腔體(ti)(ti)內的液(ye)體(ti)(ti)位移，液(ye)滴從噴(pen)嘴噴(pen)出(chu)來。根據流體(ti)(ti)的物理性質和壓電控制(zhi)參數，可(ke)以使用直徑為(wei)40μm的噴(pen)嘴，將液(ye)滴體(ti)(ti)積控制(zhi)在(zai)100 pL至(zhi)250 pL的范圍內。

    芯(xin)片連接(jie)到(dao)儲(chu)存器，可(ke)(ke)以(yi)裝載(zai)體積為5至(zhi)100μL的細胞懸浮(fu)液。通過簡單(dan)的手動上樣法將(jiang)細胞懸浮(fu)液裝載(zai)到(dao)容器中來，芯(xin)片通過毛細管力自我填充，因此可(ke)(ke)以(yi)在樣品加載(zai)后直接(jie)打印。 

技術亮點：

單細(xi)胞(bao)的證據可(ke)追溯性(xing)

在cartridge分離細(xi)胞(bao)(bao)前(qian)后的過程中(zhong)，會連續拍(pai)取(qu)多(duo)張細(xi)胞(bao)(bao)圖片，證實(shi)克(ke)隆(long)來自(zi)于單個細(xi)胞(bao)(bao)。這些圖片會根據孔(kong)板的位置進行命名，并存儲在硬盤中(zhong)，以便追蹤。

單細胞(bao)打印效率高(gao)，且適用于多個細胞(bao)系

CloneSelect SCP打(da)印效率普(pu)遍高于96%,有的細(xi)(xi)胞(bao)甚至達到100%。分離(li)(li)快速，一個96孔板(ban)只需2-3min，且每個孔都有多張(zhang)圖片證(zheng)實為單(dan)細(xi)(xi)胞(bao)，該技術已經應(ying)用于在多種細(xi)(xi)胞(bao)的單(dan)細(xi)(xi)胞(bao)分離(li)(li)如CHO, HEK,Hela，L929，U2OS等。

細胞(bao)無損(sun)傷，單(dan)細胞(bao)存活(huo)率(lv)高

細(xi)(xi)胞無需標記染(ran)色，沒(mei)有(you)(you)激光損傷(shang)，沒(mei)有(you)(you)電壓的影響(xiang)，直接采用 catridge進行分離(li)，所以細(xi)(xi)胞沒(mei)有(you)(you)任何損傷(shang)，分離(li)后的細(xi)(xi)胞存活率(lv)高，克隆恢復率(lv)高。

應用領域

•  單克隆篩選 

•  單細胞基(ji)因(yin)組(zu)學(xue)

•  單細胞PCR

•  稀有細胞的分離

應用案例

    克隆細胞系(xi)開(kai)發(fa)在單抗領域(yu)是一個至關重要的(de)環節(jie)。現有(you)的(de)細胞系(xi)開(kai)發(fa)流程存在很(hen)多(duo)弊端如缺(que)乏單克隆證據，單細胞分(fen)離(li)效率(lv)低下(xia)，單細(xi)胞存活率(lv)低等。
    SCP技術不僅能快速有效的分離單細胞，還(huan)能提供(gong)單克隆來源的證(zheng)據，且保證(zheng)細胞高的存活率以及ling風險(xian)的交叉污染。單細(xi)胞(bao)(bao)打印機SCP支持96孔和384孔板,已經成功應用于(yu)一系列典型的(de)細(xi)胞(bao)(bao)系如CHO, U2OS，HEK293, L929，Hela細胞等。

選型列表