效率與(yu)合規之間的平衡——在(zai)生物制藥生產(chan)中，DNA 去除的巧妙解決(jue)方案

　　默克限制性內切酶典型應用：

　　• 為達到(dao)藥品監管當(dang)局對(dui)生(sheng)物制品不(bu)斷提高的核酸(suan)殘量限制而提供的解(jie)決方案(an)

　　• 大大降低核酸(suan)物質(zhi)對(dui)目標分離(li)物純化及生物活性的(de)干擾，終(zhong)有效提高生化藥物在純化工藝(yi)過程中(zhong)的(de)產品收(shou)率

　　1.產品簡介：

　　是(shi)用(yong)于生化藥物生產的(de)外源(yuan)性核酸酶(mei)。其分子量為 30 KD，等電點為 pH 6.85。

　　Benzonase® 在(zai) pH 6—10, 0—42℃條件(jian)(jian)下能有(you)(you)效工(gong)作(zuo)(zuo)。使(shi)用時(shi)必須有(you)(you) Mg²+(1-2mM)存在(zai)，以作(zuo)(zuo)為激(ji)活劑(ji)(詳(xiang)細 操作(zuo)(zuo)條件(jian)(jian)參后)。此產(chan)品供應(ying)時(shi)以 20mM Tris-HCI(pH 8.0)，2mM MgCI2，20mM NaCI 作(zuo)(zuo)為緩沖液，50%(v/v) 甘油作(zuo)(zuo)為穩定劑(ji)，分(fen)成 10 萬，50 萬酶活性包(bao)裝(zhuang)單位。

　　同時每批的(de)一級純(chun) Benzonase®(Purity I，99%)核酸(suan)內切(qie)酶的(de)內毒素含量都(dou)(dou)進行(xing)獨立嚴格測定，以滿足(zu)生(sheng)化制藥(yao)的(de)生(sheng)產需要(yao)。其整體內毒素含量都(dou)(dou)小于 0.25 EU per 1.000 units(LAL test)。

　　2. 監管信息：

　　美國食品藥(yao)物(wu)(wu)管理局(FDA)規(gui)章條(tiao)例被(bei)視為(wei)生物(wu)(wu)制藥(yao)領域嚴格的(de)(de)質(zhi)量標準(zhun)。但由(you)于過(guo)程分離原料(liao)直接應用于有(you)效成分的(de)(de)純化，而不會(hui)殘留在終的(de)(de)產品中(zhong)，因此 FDA 沒有(you)明確的(de)(de)規(gui)章來監控諸如Benzonase® 核酸內切酶這(zhe)樣(yang)的(de)(de)應用于純化領域的(de)(de)原料(liao)。但是(shi)默克(ke)對(dui)產品的(de)(de)安全性重視。在cGMP 條(tiao)件下生產，而且在 FDA 擁有(you) DMF 文(wen)件(II 類，注(zhu)冊(ce)號(hao) BBMF5403)。另(ling)外(wai)，默克(ke)通過(guo) DIN ISO9001 和 14001 質(zhi)量管理體(ti)系認(ren)證。

　　• 可降(jiang)解各種形態的 DNA 和 RNA(包括：單鏈(lian)，雙鏈(lian)，環狀以及環狀超螺旋型)

　　• 廣泛的可操作條件(可在通(tong)常純化工藝(yi)條件下配合使用)

　　• 高效的(de)核酸酶活性，活性高達(>1.0 x 106 Units/mgprotein*)

　　• 被(bei)廣泛應用(yong)于生(sheng)物制藥行業的各(ge)領(ling)域(疫苗類(lei)制品，基(ji)因治療法中病毒載體的生(sheng)產，治療性(xing)蛋(dan)白(如：包(bao)涵體的處理)，真核生(sheng)物系統表達(da)的單(dan)克隆抗體)

　　• 無蛋白酶活性(基于現有的蛋白酶測定(ding)方法) • Under standard conditions 1ng (ca. 1U) of Benzonase® cleaves Ca. 1.5μg of native DNA per minute resulting in acid soluble fragments

　　• 為確(que)保 FDA 對生物重組類產品(pin)中(zhong)核酸殘留(liu)量(liang)的嚴格 限制(核酸含量(liang) <100pg per dose)，利用Benzonase® 核酸內(nei)切酶來去除產品(pin)中(zhong)的核酸物質。

　　&bull; 降低細胞破碎時被處理樣品的(de)粘(zhan)度，以提高后續(xu)純化過程(cheng)的(de)效率(lv)和終(zhong)產品收率(lv)。

　　&bull; 用(yong)于包涵(han)體的(de)處理，以提(ti)高復性(xing)后可溶性(xing)包涵(han)體的(de)收率。

　　• 利用 Benzonase® 核(he)酸酶對 2D—凝膠(jiao)電泳(yong)的樣品進行上樣前處(chu)理，消(xiao)除樣品中核(he)酸物質對蛋白的影響，終(zhong)明顯提高(gao) 2D 電泳(yong)的分(fen)辨率。

　　默克限制性內切酶包裝單位 訂貨號

　　Benzonase® 非限制性核酸(suan)內切酶一級(ji)純(purity grade Ⅰ 99%)250 U/ul， for Biotechnology

　　100, 000 U/vial 1.01695.0001

　　500, 000 U/vial 1.01697.0001

　　5, 000, 000 U/vial 1.01697.0010

　　Benzonase® 非限制(zhi)性(xing)核(he)酸內(nei)切(qie)酶二級純(purity grade Ⅱ 90%)250 U/ul， for Biotechnology

　　100, 000 U/vial 1.01654.0001

　　500, 000 U/vial 1.01656.0001

　　Benzonase® 非(fei)限制性核(he)酸內切(qie)酶(mei) ELISA kit II 檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒for the immunological detection of Benzonase® endonuclease

　　5 plates(8x12)plus reagents 1.01681.0001